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受体细胞

受体细胞是指在转化和转导(感染)中接受外源基因的宿主细胞。

受体细胞也叫宿主细胞。受体细胞有原核受体细胞(最主要是大肠杆菌)、真核受体细胞(最主要是酵母菌)、动物细胞和昆虫细胞(其实也是真核受体细胞)。 原核受体细胞中,最常用的宿主细胞是大肠杆菌。

作为基因工程的受体细胞必须具备下面的性能:

(1)具有接受外源DNA的能力;

(2)一般应为限制酶缺陷型(或限制与修饰系统均缺陷);

(3)一般应为DNA重组缺陷型;

(4)不适于在人体内或在非培养条件下生存;

(5)它的DNA不易转移。

可作为受体细胞的原则:

①便于重组DNA分子导入

②便于重组DNA分子稳定存在于细胞中

③便于重组子的筛选

④遗传稳定性高,易于扩大培养与发酵

⑤安全性高,无致病性

⑥最好是内源蛋白水解酶缺失或含量低

⑦密码子无明显偏爱性

⑧具有较好的翻译后加工机制,便于真核基因的表达

⑨理论与实践上具有较高的应用价值 原核生物作为受体细胞的优劣:

优点: 劣势:

(1)不具纤维素壁

1)不具真核蛋白折叠系统

(2)无核膜

(2)不具真核蛋白加工系统

(3)基因组简单,便于遗传分析

(3)蛋白酶降解异源蛋白

(4)单细胞

目前作为受体菌的原核生物有:

(1)大肠杆菌

革兰氏阴性菌

a.基因组、遗传背景了解最清楚

b.易培养、繁殖迅速

(2)枯草杆菌

革兰氏阳性菌

a.具胞外酶分泌-调节基因,能将表达产物

分泌到培养基;

b.无内毒素;

c.易于保存与培养。 (3)蓝细菌

a.光能自养型,易于培养;

b.与植物密码子和启动子的通用性,

易于表达植物基因

目前,以微生物(主要有大肠杆菌、枯草杆菌和酵母菌)为受体细胞的基因工程在技术上最为成熟,在生物制药中也得到广泛的应用。大肠杆菌虽然是条件致病菌,但是通过人工改造,可以使它成为一个很安全的宿主菌。

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